三维确证试验：
材料：提供酶粗提取物20人次、0.1M磷酸盐缓冲液(PH7. 0)20人次、心脑浸液20人次头孢西丁（瓶）20人次、MH琼脂平板、0.5号麦氏比浊管自备。
一．酶粗提取物的方法：调取血平板上过夜的菌落制成0.5号麦氏单位菌悬液取50ul加入12ml心脑浸液35℃培养4小时，4000rpm离心20分钟，弃取上清，将沉淀物放置i-20'C反复冻融8次以上，加入1 5ml O OIM磷酸盐缓冲液(PH7. 0)混匀，放置4'C，12000g离心1小时，取上清（细菌培养为阴性）-20C保存。

二．操作方法和结果判读：按标准纸片扩散法操作，将ATCC 25922大肠埃希菌制成0.5号麦氏单位的菌悬液均与土语MH平板上。将30ug/片头孢西丁贴在MH平板上，使用刀片在离纸片边里向外切-条狭缝，取25～30ul酶粗提取物由里向外加入狭缝中避免液体溢出。35°过夜，若看到狭缝与抑菌交界处有细菌扩大生长，判断为三维试验结果阳性。反之在交界处无细菌生长，抑菌环为原形，为阴性。同时使用AmpC酶阳性和l羽性菌株做指控。   【返回】