链球菌属内鉴别,首先观察在血液琼脂平板上的溶血环,是B溶血型,或非B溶血型,参照以下表对这二类溶血型菌种做鉴别。
表1? β溶血链球菌的鉴别特征
血型学分群 |
种名 |
PYR |
VP |
CAMP |
七叶苷 |
杆菌钛敏感 |
蕈糖 |
山梨醇 |
A |
化脓链球菌 |
+ |
- |
- |
- |
+ |
+ |
- |
B |
无乳链球菌 |
- |
+ |
+ |
- |
- |
+ |
- |
C |
马链球菌 |
- |
- |
- |
d |
- |
- |
- |
C |
似马链球菌 |
- |
- |
- |
- |
- |
+ |
- |
C |
售疫链球菌 |
- |
- |
- |
d |
- |
- |
+ |
G |
Lancefieed G群 |
- |
- |
- |
+ |
- |
|
|
(A,C,F,G或未分群b) |
咽峡链球菌 |
- |
+ |
- |
+ |
- |
|
- |
表2非β溶血链球菌的鉴别特征
实????????????? 验 |
菌种 |
Optochin
敏感 |
胆汁溶菌 |
胆汁七
叶苷 |
6.5%NaCL |
PYR |
CAMP |
肺炎链球菌 |
+ |
+ |
- |
- |
- |
- |
牛链球菌 |
- |
- |
+ |
- |
- |
- |
无乳链球菌 |
- |
- |
- |
± |
- |
+ |
草绿色链球菌 |
- |
- |
-b |
- |
- |
- |
营养变异链球菌 |
- |
- |
- |
- |
+ |
- |
1、CAMP试验
材料:血平板,金黄色葡萄球菌
方法:在血平板上,用金黄色葡萄球菌划种一条直线,再将被检菌距金黄包葡萄球菌3nun处垂直接种一短线。用同样方法接种阴性和阳性对照菌0 35'Cz烛缸孵育过夜。
观察结果:在被检菌接种线与金葡萄接种线之间有一个矢形(半月形)加强溶血区,此即CAMP试验阳性。阴性无加强溶血区。
2、杆菌肽敏感实验
材料:杆菌肽纸片,血平板
方法:挑取被检菌落,密涂于血平板上,接种量应大,以免l州段附性贴上杆菌肽纸片,35'C烛缸过夜。
观察结果:形成抑菌环为敏感,则被检菌推断为A群链球菌。
3、胆汁溶菌实验
滴一滴l0%去氧胆酸钠于生长菌落的血培养基上几分钟后,有菌落自溶现象。
4、PYR试验
接种待检菌,放35℃温箱孵育18—24小时后,加入PYR显色剂,红色为阳性。
5、Optochin敏感试验
挑取被检菌落,涂布在血平板或血MH上,贴Optocbin纸片于血平板或血MH上,35'C,烛缸孵育18小时,观察结果,抑菌环≥14mm为敏感,推断肺炎链球菌。
6生化反应判断标准
接种待检菌于下列培养基中,孵育18-24小时,判断标准
试验项目??? ?阳性结果??? ?试验项目??? ???阳性结果
七叶营试验? 变黑色??? 胆汁七叶苛斌验??? ?变黑
蕈糖??? ?????变黄??? ????6.5ToNaCL??? ???生长
山梨醇??? ???变黄??? ?????VP试验??? ?????红色(每Iml培养液中加入VP甲液0 5ml.乙液0 lml日次序小能颠倒)
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