葡萄球蔺是微球菌科中的一个菌属,目前从越来越多的事实说明,过走认为不致病菌的葡萄球菌也呵引起各种感染,为了更好地鉴别葡萄球菌属,我们精选了几个试验及抗生素试验来代替传统鉴定方法,用此试验方法优于糖发酵试验,结果迅速、稳定、准确。
方法:1、菌液制备:取培养基上新鲜菌落制成麦氏浊度管3号及0.5号菌液各一管约1.5ml,另取已制备好的3号菌液4滴,加入2滴甲苯用于ONPG试验。
2、试验操作:
(1) 血浆凝固酶:朋EDTA抗凝的免血浆做最好。
(2)硷磷酶、尿素酶、PYR及木糖试验均加相当于3号麦氏比浊管浓度菌液各4滴。
(3)ONPG加相当于3号麦氏比浊管浓度菌液4滴及2滴甲苯。(从含乳糖培养基上取菌落)
(4)O-F葡萄糖管用液体石腊加封。??? 、
(5)新生霉素及多粘菌素试验,按K-B法操作,用MH培养基。??? ‘
3、培养条件:放35°C温箱中,6小时观察结果,抗生素纸片药敏试验放温箱18-24小时培养。
4、观察结果:
(1)血浆凝固酶在10秒内出现凝集为阳性。
(2)碱磷酶试验管内(孔内)加2滴IMNaOH5分钟变黄色为阳性。
(3)ONPG试验变成黄色为阳性。
(4)尿素试验交成红色为阳性。
(5)PYR试验管(孔)内加入一滴PYR显色剂5分钟呈现红色为阳性。
(6)木糖试验变成黄色为阳性。
(7)无氧条件下发酵葡萄糖为葡萄球菌,不发酵为微球菌。
(8)多粘菌素:有抑菌圈为敏感,无抑菌圈为耐药。
(9)新生霉素:直径>16mm敏感,≤16mm耐药。
(10)按葡萄球菌生化鉴定表判断结果。
葡萄球菌属性生化鉴定表
菌种 |
血浆
凝固酶 |
硷林酶 |
ONPG |
脲酶 |
PYR |
木糖 |
新生霉素 |
O-F
葡萄糖 |
多粘菌素 |
金黄色葡萄求菌 |
+ |
+ |
- |
d |
- |
- |
- |
+ |
+ |
表皮葡萄球菌 |
- |
+ |
- |
+ |
- |
- |
- |
+ |
+ |
腐生葡萄球菌 |
- |
- |
+ |
+ |
- |
- |
+ |
+ |
- |
溶血葡萄球菌 |
- |
- |
- |
- |
+ |
- |
- |
+ |
- |
里昂葡萄球菌 |
- |
- |
- |
d |
- |
- |
- |
+ |
- |
斯氏葡萄球菌 |
- |
+ |
(+) |
- |
+ |
- |
- |
+ |
- |
中间葡萄球菌 |
|
+ |
+ |
+ |
+ |
- |
- |
+ |
- |
家畜葡萄球菌 |
+ |
+ |
- |
d |
- |
- |
- |
+ |
+ |
头部葡萄球菌 |
- |
- |
- |
- |
- |
- |
- |
+ |
- |
华纳葡萄球菌 |
- |
- |
- |
+ |
- |
- |
- |
+ |
- |
孔氏葡萄球菌 |
- |
- |
- |
- |
- |
- |
+ |
+ |
- |
木糖葡萄球菌 |
- |
d |
+ |
+ |
d |
+ |
+ |
+ |
- |
人型葡萄球菌 |
- |
- |
- |
+ |
- |
- |
- |
+ |
- |
解糖葡萄球菌 |
- |
d |
- |
- |
- |
- |
- |
+ |
- |
模仿葡萄球菌 |
- |
- |
+ |
+ |
+ |
- |
- |
+ |
- |
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